Das VIASURE Colour Compensation Kit dient der Erstellung einer Farbkompensationsdatei für die Real-Time-PCR-Cycler LightCycler® 480 I/II und den Cobas z480 Analyzer (Roche). Dieser Test wird als Kalibrierungsverfahren eingesetzt, um Fluoreszenz-Übersprechen (Crosstalk-Phänomen) zu kompensieren und so eine korrekte Interpretation der Ergebnisse von Multiplex-Assays zu gewährleisten.
Multiplex-Real-Time-PCR-Assays ermöglichen die gleichzeitige Amplifikation und Detektion von zwei oder mehr verschiedenen Zielsequenzen in einer einzigen PCR-Reaktion, wodurch im Vergleich zu Monoplex-Assays Zeit und Probenvolumen eingespart werden. Dabei können sich die Emissionsspektren der verschiedenen Farbstoffe überlappen und den sogenannten „Crosstalk“-Effekt verursachen. Bei diesem Phänomen werden Fluoreszenzsignale eines Farbstoffs in benachbarten Kanälen erfasst, was zu falsch-positiven Ergebnissen führen kann.
Das VIASURE Colour Compensation Kit enthält in jedem Well alle für die Durchführung von acht verschiedenen Singleplex-Real-Time-PCR-Reaktionen (als Replikate) erforderlichen Komponenten in stabilisierter Form (spezifische Primer/Sonden, dNTPs, Puffer, Enzyme).
